随着养猪生产的发展和产业化进程的推进。人们对猪人工授精重要性的认识越来越深刻，在现代养猪生产和育种工作中，人工授精正成为一种非常重要的生产途径。近年来，由于大规模、高度集约化现代化畜牧业的出现，更进一步促进了人工授精的应用和发展。我国猪的稀释、保存与应用，在20世纪70～80年代已在全国各省区推广应用，并取得了良好的效果。现就猪人工授精的冷冻稀释配制技术简介如下，供广大同仁参考。 1 品质的检查 采集后，迅速置于30℃左右的恒温水浴中，然后取样进行综合分析，确定精子是否可以用于保存或输精。 1.1 感官检查 ①颜色：公猪正常的颜色为乳白色或淡灰白色，若为颜色或中带有血液，均为不正常颜色，说明公猪的生殖道有炎症或损伤；如果呈淡绿色，是混有脓汁；呈粉红色，是混有血液；呈*，是混有尿液。颜色异常的应弃之不用。 ②气味：正常的一般无味或略带腥味。如果的腥味很浓，或有臭味和尿味，属不正常，应弃之不用。 ③量：猪正常的量，我国的地方品种猪为150～300mL/次，外国引入品种为250～400mL/次。如果公猪的量过少，说明公猪利用过度或饲养管理不当，应采取措施，力求在短期内恢复其正常的量。 1.2 镜检 ①精子的活力：精子的活力是指原在37℃下下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率。由于其受环境因素的影响很大，为了得到客观、准确的结果，在检查精子活力时应在恒温 （37～38℃）条件下进行，避免阳光直接照射到样品上，并远离易挥发的化学物质或消毒剂。为了保证获得较高的受胎率，用于输精的精子活力不得低于0.4，冻精解冻后的精子活力不低于0.3。 ②精子的密度：正常的精子密度平均为2.5亿（1亿～3亿之间），从镜检中看到精子密度高的往往呈云雾状。现在大都借助于分光光度计、电脑处理机、数字显示打印机等结合进行检查。 2 的稀释和保存 经检查合格后，尚需经过稀释、分装、保存和运输等过程，最后用于输精。 2.1 猪稀释液的配制 常用的猪稀释液种类有很多，其配方有以下几种： ①奶粉稀释液：奶粉9g，蒸馏水100mL。 ②葡柠稀释液：葡萄糖5g、柠檬酸钠0.5g、蒸馏水100mL。 ③“卡辅”稀释液：葡萄糖6g、柠檬酸钠0.35g、碳酸氢钠0.12g、乙二胺四乙酸钠0.37g、青霉素3万Iu、链霉素10万Iu、蒸馏水100mL。 ④氨卵液：氨基乙酸3g、蒸馏水100mL配成基础液，基础液70mL加卵黄30mL。 ⑤葡柠乙液：葡萄糖5g、柠檬酸钠0.3g、乙二胺四乙酸0.1g、蒸馏水100mL。 ⑥葡柠碳乙卵液：葡萄糖5.1g、柠檬酸钠0.18g、碳酸氢钠0.05g、乙二胺四乙酸0.16g、蒸馏水100mL，配成基础液，基础液97mL加卵黄3mL。 以上几种稀释液除“卡辅”外，抗生素的用量为青霉素1000lu/mL、双氢链霉素1000μg/mL。 2.2 国外常用的3种稀释液的配制 ①BL-1液（美国）：葡萄糖2.9%、柠檬酸钠1%、碳酸氢钠0.2%、氯化钾0.03%、青霉素1000Iu/mL、双氢链霉素0.01%。 ②IVT液（英国）：葡萄糖0.3g、柠檬酸钠2g、碳酸氢钠0.21g、氯化钾0.04g、氨苯磺酸0.3g、蒸馏水100mL，混合后加热使之充分溶解，冷却后通入二氧化碳约20分钟，使pH达到6.5。 ③奶粉-葡萄糖液（日本）：脱脂奶粉3.0g、葡萄糖9g、碳酸氢钠0.24g、α-氨基-对甲苯磺酰胺盐酸盐0.2g、磺胺甲基嘧啶钠0.4g、灭菌蒸馏水200mL。 2.3 的稀释和稀释倍数 稀释之前需确定稀释的倍数。稀释倍数根据内精子的密度和稀释后每毫升应含的精子数来确定。猪经稀释后，要求每毫升含1亿个精子。如果密度没有测定，稀释倍数国内地方品种一般为0.5～1倍，引入品种为2～4倍。 稀释应在采出后尽快进行，而且与稀释液的温度必须调整到一致，一般是将与稀释液置于同一温度（30℃）中进行稀释。 2.4 的保存 为了延长精子的存活时间，扩大的使用范围，便于长途运输，稀释后的需进行保存。 ①常温保存：在15～20℃室温条件下，利用稀释液的弱酸性环境来抑制精子的活动，减少能耗。而稀释液中的抗菌素类药物可以抑制微生物繁衍，减少对精子的危害，使得以保存，保存时间为3天左右。 ②低温保存：在0～5℃条件下，精子的活力被抑制，降低代谢水平，减少能耗，精子的存活时间得以延长。在低温保存下，10～0℃温度范围对精子是一个危险的温度范围区，如果从常温状态迅速降至0℃，精子就会发生不可逆的冷休克现象。所以在低温保存之前，需经预冷平衡。其具体做法为：每分钟降温0.2℃，用1～2小时完成降温全过程。此外，在稀释液内添加卵黄、奶类等物质也可以提高精子的抗冷能力。 在农村无冰源条件下，可以采用以下方法制造冷源： ①将食盐40g溶于1500mL冷水中，加入氯化铵400g，装入广口保温瓶内，其温度可以降至2℃左右。如果想长期维持低温，每隔2天重新添加一次氯化铵。 ②将尿素60g溶于100mL冷水中，可以降温至5℃。如果将其溶于冰水中，可以降温至-5℃。 ③将贮精瓶包裹结扎盛于塑料袋内，扎好袋口。将贮精塑料袋放于竹筒或竹篮等容器中，再将容器吊沉于井底保存。
